Brómelain ensímdufter prótein vatnsrofandi ensímkerfi sem er til staðar í hangandi ananasplöntum. Það hefur margs konar notkun í matvæla- og lyfjaiðnaði. Hins vegar hefur slæmur stöðugleiki áhrif á notkun þess, sérstaklega í lyfjaiðnaðinum. Í þessari grein voru áhrif rakaskilyrða hitastigsskilyrði og „Coy geislun á ananaspróteasa rannsökuð með hráefni lyfjafræðilegs ananaspróteasa.
1 Efni og aðferðir
1.1 Brómelín hráefni
Brómelain ensímduft
1.2 Áhrif rakaumhverfis
Vegið og afgreitt ensímið var sett opið í lokaða þurrkara (stofuhita). Kísilgel, NaQ mettuð lausn og KNO, mettuð lausn voru sett inn í þurrkarann. Hlutfallslegur raki innra umhverfisins var 0,1 prósent (75±1) prósent 2,92 prósent og sýni voru tekin með reglulegu millibili til að ákvarða ensímvirkni.
1.3 Áhrif hitastigs
Vegið og skammtað ensím voru sett við hitastig 1 ~ 4 gráður, 29 gráður og 55 gráður í sömu röð og sýni voru tekin reglulega til að ákvarða ensímvirkni.
1.4 Geislameðferð
Vegin og afgreidd ensím voru loftþétt innsigluð í skilvindurör úr plasti (PVC). Sýnin voru geisluð með "Coy geislun" við stofuhita (~20 gráður). Skammtahraði var 198 kGy/klst. og frásogaðir skammtar voru 4 kGy8 kGy og 12 kGy. 3 dögum eftir geislun sýnanna var ensímvirkni og heildarfjöldi baktería ákvörðuð.
1.5 Ákvörðunaraðferð
Brómelain var ákvarðað með FIP aðferð. Týrósín vatnsrofið úr kaseini var magnmælt með UV litrófsmæli og ensímvirkni var metin. Kasein var notað sem hvarfefni og vatnsrofið með ananaspróteasa.
Heildarfjöldi baktería var ákvarðaður með því að nota plötutalningaraðferð.
2 Úrslit
2.1 Áhrif rakaskilyrða á geymslu brómelínensímdufts
Niðurstöður áhrifa rakaskilyrða á geymslu brómelíns eru sýndar í töflu 1. Eins og sést í töflu 1 var brómelínensímvirkni tiltölulega stöðug í þurru umhverfi. Hraði óvirkjunar ensíma var hraðað með aukningu á rakastigi umhverfisins. Á seint stigi tilraunarinnar minnkaði ensímvirknin verulega við aðstæður með miklum raka. Aðeins 40,4 prósent 14,4 prósent af ensímvirkninni voru eftir eftir 105 d og 315 d af geymslu á brómelaíni, í sömu röð. Þar sem varðveisla ensímvirkni var 80,3 prósent og 80,0 prósent undir rakastigi (75 plús 1) prósent.
Það má sjá af meðfylgjandi mynd að við þurrt eða lágt rakastig. Óvirkjun ananaspróteasa átti sér stað á fyrstu til seinustu stigum varðveislunnar jafnaði. Þetta er vegna þess að raki ensímsins er meiri en rakastig umhverfisins á fyrstu stigum varðveislu. Hærri raki veitir ensímbyggingunni ákveðinn sveigjanleika. Lögun virku miðju ensímsins er viðkvæm fyrir breytingum. Þegar ensímið nær sléttu götunni með þurru umhverfinu minnkar raki ensímsins og ensímvirknin hefur tilhneigingu til að koma á stöðugleika. Það má líka sjá á myndinni að ensímvirkni hefur farið minnkandi í umhverfi með mikilli raka. Ástæðan fyrir þessu er vegna sjálfsvatnsrofs próteasans, auk þess að mikill raki eykur sveigjanleika ensímbyggingarinnar.
2.2 Áhrif hitastigs á geymslu jurtabrómelínensímdufts
Tafla 2 sýnir niðurstöður rannsóknarinnar á því hvernig hitastig hefur áhrif á geymslu ananaspróteasa. Ananaspróteasar voru óvirkir við bæði háan og lágan hita, eins og sýnt er í töflu 2, þar sem hátt hitastig var minna stöðugt. Óvirkjunartíðni þeirra var hraðari á fyrstu stigum geymslu og hóflegri á síðari stigum. Varðveisluhraði ensímsins eftir 285 dögum við 51 gráðu (68.0 prósent) var meiri en eftir 105 dögum við háan raka (40,4 prósent). Í þessu tilviki voru áhrif hitastigs á ensímið mun minni en rakastig. Áhrif hitastigs á ensímið voru mun minni en rakastigs.
2.3 Áhrif 60Cor geislunar á ananaspróteasavirkni og bakteríudrepandi áhrif
Niðurstöður áhrifa 60Cor geislunar á ananaspróteasavirkni og dauðhreinsandi áhrif eru sýndar í töflu 3. Eins og sést í töflu 3 var tap á ensímvirkni 10,6 prósent, 11,0 prósent og 15,5 prósent þegar frásogaður skammtur var 4 kGy 8 kGy og 12 kGy, í sömu röð. Ófrjósemisáhrif þeirra voru sambærileg við 99,9 prósent, 100 prósent og 100 prósent, í sömu röð. Til að lágmarka tap á ensímvirkni er hægt að velja 4 kGy eða 8 kGy skammt í samræmi við flutning ensímgjafans. Eins og magn af sveppum, bæði dauðhreinsun, og draga úr tapi á ensímvirkni
3 Umræður
Í þessari tilraun var næmi ensímsins fyrir raka meira en fyrir hitastigi. Lifunarhlutfall ensíma undir þurrkunarumhverfi með kísilhlaupi var betra en við lágt hitastig og ensímóvirkjunarhraði í umhverfi með miklum raka var marktækt meira en undir 55 gráðum. Umhverfið með mikilli raka jók rakainnihald ensímsins og varð aðalþátturinn í óvirkjun ensíma. Þetta er nátengt sjálfsvatnsrofinu á ananaspróteasa. Þess vegna ættum við við framleiðsluna að huga sérstaklega að rakastigi umhverfisins þar sem ensímið er geymt og þurrki ensímsins sjálfs. Að auki er ensímóvirkjun þegar "Coy geislun er notuð til að dauðhreinsa ananaspróteasa. Hvernig á að bæta enn frekar stöðugleika varðveislu og dauðhreinsunar á brómelaíni? ófrjósemisstöðugleika ananaspróteasa. Frekari rannsókna er þörf til að velja skilvirk aukefni, sem væri besta leiðin til að bæta stöðugleika varðveislu og dauðhreinsun brómelínensímdufts.aukefni verða ein leiðin.
Guanjie útvegar magn brómelínensímdufts með því að nota GDU prófunaraðferðina. Framleiðsluferlið okkar starfar undir CGMP stöðluðum verkstæðum og notar þrjár framleiðslulínur í tveimur verksmiðjum og tvær sjálfstæðar rannsóknarstofur. Fyrir allar fyrirspurnir varðandi vörur okkar, vinsamlegast hafðu samband við okkur áinfo@gybiotech.com.
